Effect of Some Cryoprotectans in Cryopreservation of Angora Buck Semen

Öz

The aim of this study was to investigate the effects of some cryoprotectants added to extender of Angora buck semen on spermatologic parameters after frozen-thawed semen. Ejaculate samples obtained from three mature Angora bucks were used in this study. Ejaculates were collected using an artificial vagina twice a week, for five weeks running, during the reproductive season. After pooling, each pooled ejaculate was split into four equal aliquots and diluted with based extender containing cryoprotectants [100 mM trehalose + 0.015 g/10 ml EDTA, 5 mM GSSG and trehalose + EDTA + GSSG (combined)], or no cryoprotectants (control) at 37oC. Diluted samples were aspirated into 0.25 ml straws, equilibrated at 5oC. Following equilibration, the straws were frozen in liquid nitrogen vapour and stored at -196oC so as to be evaluated Post-thawed spermatozoa motility did not exist significant difference at the groups with GSSG and combined (53.7±3.7%, 46.2±1.2%), compared to the control (42.5±3.2%). But groups including trehalose+EDTA significantly deteriorated the spermatozoa motility, compared to the other groups. At abnornal spermatozoa rates, while there were not statistically differences among the groups including cryoprotectants (trehalose+EDTA, GSSG, combined; 10.5±0.9%, 13.2±0.9%, 8.0±0.9%, respectively), at these groups fairly low rates (21.5±1.3%) were obtained in comparision to control, and differences between groups containing cryoprotectants and no cryoprotectants became important (P<0.05). Dead spermatoza with the lowest rate was attained at group with GSSG. At HOST, GSSG and combined groups gave the highest rates (40.5±2.7% and 27.0±1.4%, P<0.05). In conlusion, it was seen that cryoprotectants added to extender of Angora buck semen provided the significant contributions on some spermatological parameters after thawing.

Anahtar Kelimeler

• Cryoprotectant, cryoprotective effect, semen cryopreservation, spermatologic parameters, Angora buck

ANKARA TEKESİ SPERMASININ DONDURULMASINDA BAZI KRİYOPROTEKTANLARIN ETKİSİ

Öz

Bu çalışmanın amacı Ankara keçisi tekesi sperması sulandırıcısına ilave edilen bazı kriyoprotektanların spermanın dondurulup çözdürülmesi sonrası spermatolojik parametrelere etkisinin araştırılması olmuştur. Çalışmada, 3 baş ergin Ankara keçisi tekesinden alınan ejakülatlar kullanılmıştır. Ejakülatlar çiftleştirme mevsiminde sun’i vajen kullanılarak haftada iki kez, beş hafta süresince toplanmıştır. Alınan ejakülatlar birleştirildikten sonra 4 eşit hacme bölünmüş ve 37oC’taki su banyosunda kriyoprotektan içeren [100 mM trehaloz + 0.015 g/10 ml EDTA, 5 mM okside glutatyon (GSSG) ve trehaloz + EDTA + GSSG (kombine)] ve içermeyen (kontrol) temel sulandırıcıyla sulandırılmıştır. Sulandırılan spermalar payetlere (0.25 ml) çekilerek 5oC’ta ekilibrasyona bırakılmıştır. Ekilibrasyonu izleyen süreçte payetler sıvı azot buharında dondurularak daha sonra değerlendirilmek üzere -196oC’taki sıvı azotta saklanmıştır. Çözüm sonu spermatozoa motilitesinde, GSSG ve kombine gruplarında (%53.7±3.7 ve 46.2±1.2) kontrol grubuna (%42.5±3.2) göre önemli farklılık çıkmamıştır. Fakat trehaloz+EDTA içeren grup spermatozoa motilitesini diğer gruplara göre önemli oranda kötüleştirmiştir. Anormal spermatozoada kriyoprotektan içeren gruplar (trehaloz+EDTA, GSSG, kombine; %10.5±0.9, 13.2±0.9, 8.0±0.9) arasında istatistiksel olarak farklılıklar önemsiz olurken, kriyoprotektan içeren gruplarda kontrol grubuna (%21.5±1.3) göre oldukça düşük oranlar elde edilmiş ve aradaki farklılıklar önemli (P<0.05) olmutur. GSSG içeren grupta ölü spermatozoa bakımından en düük oran (%30.0±2.0) elde edilmitir (P<0.05). Hipoozmotik ime testinde GSSG ve kombine grupları en yüksek oranı vermilerdir (%40.5±2.7 ve 27.0±1.4) (P<0.05). Sonuç olarak, Ankara keçisi tekesi sperması sulandırıcısına katılan kriyoprotektanların (GSSG, trehaloz + EDTA ve trehaloz+ EDTA+ GSSG grupları) çözüm sonrası bazı spermatolojik parametreler üzerine önemli katkılar saladıı görülmütür.

Anahtar Kelimeler

• Kriyoprotektan, kriyoprotektif etki, spermanın dondurulması, spermatolojik parametreler, Ankara tekesi