Determination And Evaluation Of Anae Positive T Lymphocytes In Raınbow Trout (Oncorhynchus Mykiss)

Öz

The aim of this research was to identify the number of alpha-naphthyl acetate esterase (ANAE) positive T lymphocytes in the peripheral blood of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Peripheral blood was collected from 10 healthy rainbow trout obtained from a trout farm in Iğdır province. ANAE histochemical identification was performed on the prepared blood smear slides, and the slides were observed under a light microscope. ANAE-positive lymphocytes, which have brown-red reaction granules in their cytoplasm, were identified as T lymphocytes. ANAE positive cell rates were determined after counting 200 lymphocytes from each slide. As a result of this research, there was no positive ANAE reaction in basophilic, eosinophilic, and pseudo-eosinophilic cells, and a negative or weak reaction was identified in monocytes. While there was considerable ANAE positivity in some lymphocytes, there was no reaction in others. The ANAE-positive T lymphocytes rate in rainbow trout was found to be 61.45 ± 2.13 %. It can be concluded that ANAE determination is a reliable, economical, and applicable histochemical method for T lymphocyte detection in rainbow trout, and that it can give useful information regarding the immune system in fish, disease immunologic monitoring, and efficiency of vaccination studies.

Anahtar Kelimeler

• ANAE
• immune system
• Oncorhynchus mykiss
• Rainbow trout
• T lymphocyte

Destekleyen Kurum

NO

Proje Numarası

No financial support was received for the present study.

Etik Beyan

Permission to carry out this experiment was taken from the Animal Experiments Ethics Committee of Kafkas University under the code KAU-HADYEK/2026-112.

Teşekkür

NO

Gökkuşağı Alabalıklarında (Oncorhynchus Mykiss) Anae Pozitif T Lenfositlerinin Belirlenmesi Ve Değerlendirilmesi

Öz

Bu çalışma, sağlıklı gökkuşağı alabalıklarında (Oncorhynchus mykiss) periferik kandaki alfa-naftil asetat esteraz (ANAE) pozitif T lenfositlerinin belirlenmesi amacıyla gerçekleştirildi. Araştırmada, Iğdır ilindeki bir alabalık üretim tesisinden temin edilen 10 sağlıklı gökkuşağı alabalığından alınan periferik kan örnekleri kullanıldı. Kan frotilerine ANAE histokimyasal demonstrasyonu uygulanarak preparatlar ışık mikroskobunda incelendi. Sitoplazmalarında kahverengi-kırmızı reaksiyon granülleri bulunan lenfositler ANAE pozitif kabul edilerek T lenfosit olarak değerlendirildi. Her preparatta 200 lenfosit sayılarak ANAE pozitif hücre oranları hesaplandı. İncelemeler sonucunda bazofil, eozinofil ve pseudoeozinofil hücrelerinde ANAE pozitif reaksiyon gözlenmezken, monositlerde zayıf veya negatif reaksiyon saptandı. Lenfositlerin bir kısmında belirgin ANAE pozitifliği tespit edilirken, diğer kısmında reaksiyon ürünü görülmedi. Gökkuşağı alabalıklarında ANAE pozitif T lenfosit oranı %61.45 ± 2.13 olarak belirlendi. Sonuç olarak, ANAE demonstrasyonunun gökkuşağı alabalıklarında T lenfositlerin belirlenmesinde güvenilir, ekonomik ve uygulanabilir bir histokimyasal yöntem olduğu, ayrıca balıklarda bağışıklık sisteminin değerlendirilmesi, hastalıkların immünolojik takibi ve aşılama çalışmalarının etkinliğinin belirlenmesinde yararlı bilgiler sağlayabileceği kanaatine varılmıştır.

Anahtar Kelimeler

• ANAE
• bağışıklık sistemi
• Gökkuşağı alabalığı
• Oncorhynchus mykiss
• T lenfosit

Destekleyen Kurum

YOK.

Proje Numarası

No financial support was received for the present study.

Etik Beyan

Bu deneyin gerçekleştirilmesi için Kafkas Üniversitesi Hayvan Deneyleri Etik Kurulu'ndan KAU-HADYEK/2026-112 kodlu izin alınmıştır.

Teşekkür

YOK

Kaynakça

1. Aştı, R. N. (1996). Farklı hayvan türlerinin perifer kan lökositlerinde alfa naftil asetat esteraz aktivitesinin belirlenmesi. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, 43(02), 129-133. https://doi.org/10.1501/Vetfak_0000000704
2. Bayraktaroğlu, A. G., Şimşek, Ö., Kürüm, A., Arıkan, Ş., & Ergün, E. (2015). Determination of alpha-naphthyl acetate esterase (ANAE) activity in peripheral blood leukocytes of pregnant, adult, and kitten Angora cats. Turkish Journal of Veterinary & Animal Sciences, 39(1), 57-61. DOI: 10.3906/vet-1407-44
3. Blaxhall, P. C., & Hood, K. (1985). Cytochemical enzyme staining of fish lymphocytes separated on a Percoll gradient. Journal of Fish Biology, 27(6), 749-755. https://doi.org/10.1111/j.1095-8649.1985.tb03217.x
4. Çelik İ, Aştı, R. N., & Boyraz, M. Ü. (1992). Light microscopic studies on the alpha-naphthyl acetate esterase activity of the fetal bovine peripheral blood lymphocytes. Eurasian Journal of Veterinary Sciences, 8(2), 41-44.
5. Dönmez, H. H., & Sur, E. (2007). Determination of the alpha-naphthyl acetate esterase (ANAE) and acid phosphatase (ACP) activity in the peripheral blood lymphocytes of the adult duck (Anas platryhynchos). Atatürk Üniversitesi Veteriner Bilimleri Dergisi. 2 (4), 122-128.
6. Dönmez, H. H., Sur, E., & Boydak, M. (2007). Determination of alpha naphthyl acetate esterase activity in peripheral blood leucocytes of Kangal fish (Garra rufa). Eurasian Journal of Veterinary Sciences, 23(2), 81-84.
7. Kadıralieva, N., Sur, E., Öznurlu, Y., & Özaydın, T. (2020). Kırgızistan dağ yaklarının (Bos grunniens) perifer kan lökositlerinde alfa naftil asetat esteraz (ANAE) pozitivitesinin belirlenmesi. Eurasian Journal of Veterinary Sciences, 36(3) https://doi.org/10.15312/EurasianJVetSci.2020.276
8. Kılıçoğlu, B., Uyarlar, C., Tunç, A. C., Başer, D. F., Yipel, F. A., Birdane, F. M. & Acar, A. (2017). Taylara oral olarak uygulanan bitkisel yağ ekstraktı karışımının (nane, kekik, anason) immun sistem üzerine etkisi. Kocatepe Veterinary Journal, 10(4), 287-294. DOI: 10.5578/kvj.63933

9. Magnadóttir, B. (2006). Innate immunity of fish (overview). Fish & Shellfish Immunology, 20(2), 137-151. https://doi.org/10.1016/j.fsi.2004.09.006
10. Mueller, J., Del Re, G. B., Buerki, H., Keller, H. U., Hess, M. W., & Cottier, H. (1975). Nonspecific acid esterase activity: A criterion for differentiation of T and B lymphocytes in mouse lymph nodes. European Journal of Immunology, 5(4), 270-274. https://doi.org/10.1002/eji.1830050411
11. Nenciu, M., Victor, N. I. Ț. Ă., Nicolae, C., & Akbulut, B. (2022). Boosting biomass gain and meat quality of rainbow trout Oncorhynchus mykiss (Walbaum, 1792)-An approach for fostering Romanian aquaculture. AgroLife Scientific Journal, 11(1). https://doi.org/10.17930/AGL2022117
12. Oruç, E., Kısadere, İ., Kadıralıeva, N. & Sur, E. (2017). Kırgızıstan Bişkek yöresi konkur (engel) atlarında yarış öncesi ve sonrası bazı hematolojik, biyokimyasal analizler ile ANAE profili ve nazal eksfolyasyonun karşılaştırılması. Manas Journal of Agriculture Veterinary and Life Sciences, 7(1), 12-20.
13. Ozaydın, T., Sur, E., Atar, M. S., Arslan, E., Keles, A. C., & Celik, I. (2026). The effect of bisphenol A on the proportions of Alpha Naphthyl Acetate Esterase positive peripheral blood lymphocytes in rats. Eurasian Journal of Veterinary Sciences, 42:e0477. https://doi.org/10.63673/eurasianjvetsci.477
14. Özcan, Z. (2005). Determination of alpha naphthyl acetate esterase activity in the peripheral blood leukocytes in Angora rabbits. Turkish Journal of Veterinary & Animal Sciences, 29(3), 881-884.
15. Secombes, C. J., & Wang, T. (2012). The innate and adaptive immune system of fish. In Infectious disease in aquaculture. Woodhead Publishing. (pp. 3-68). https://doi.org/10.1533/9780857095732.1.3
16. Sur, E., Aydın, İ., Öznurlu, Y., Özaydın, T., Çelik, İ., & Kadıralieva, N. (2013). Merinos ırkı sağlıklı gebe koyunların perifer kan lenfositlerinde alfa naftil asetat esteraz ve asit fosfataz aktivitelerinin belirlenmesi. Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, 19(3), 483-488. DOI: 10.9775/kvfd.2012.8067
17. Tort, L. (2011). Stress and immune modulation in fish. Developmental & Comparative Immunology, 35(12), 1366-1375. https://doi.org/10.1016/j.dci.2011.07.002
18. Uribe, C., Folch, H., Enríquez, R., & Moran, G. J. V. M. (2011). Innate and adaptive immunity in teleost fish: a review. Veterinární medicína, 56(10), 486-503. https://doi.org/10.17221/3294-VETMED
19. Yalçın, A., & Kanter, M. (2018). Sıçanlarda yaşa bağlı olarak timus ve periferal kan dokusunda bulunan lenfositlerin histokimyasal ve histometrik incelenmesi. Adıyaman Üniversitesi Sağlık Bilimleri Dergisi, 4(2), 900-920. https://doi.org/10.30569/adiyamansaglik.441354
20. Yam, L. T., Li, C. Y., & Crosby, W. H. (1971). Cytochemical identification of monocytes and granulocytes. American Journal of Clinical Pathology, 55(3), 283-290. https://doi.org/10.1093/ajcp/55.3.283
21. Zapata, A., Diez, B., Cejalvo, T., Gutierrez-de Frias, C., & Cortés, A. (2006). Ontogeny of the immune system of fish. Fish & Shellfish Immunology, 20(2), 126-136. https://doi.org/10.1016/j.fsi.2004.09.005