İshalli Hastalarda Cryptosporidium Parvum\'un ELISA ve Modifiye Boyama Yöntemleriyle Araştırılması

Öz

AbstractInvestigation of Cryptosporidium Parvum by ELISA and Modified Ehrlich-Ziehl-Neelsen Stain Methods in Patients With Diarrhea Objective: Cryptosporidium spp are important agents causing diarrhea in developing and developed countries. The agent causes severe life-threatening diarrhea especially in immunocompromised hosts. Furthermore, transmission of Cryptosporidium parvum by of drinking water threats public health. The aim of this study was to compare the two methods used in determining Cryptosporidium parvum. Method: In this study 92 diarrheic stool specimens from inhabitants of Malatya Rest Home and patients with diarrhea applied to Inonu University Turgut Ozal Medical Center in Malatya are investigated for Cryptosporidium parvum copro-antigens by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) and oocysts via modified Ehrlich-Ziehl-Neelsen (m-EZN) staining and both methods are compared statistically. Results: Five specimens are found to be positive by both ELISA and m-EZN. The sensivity and spesifity of ELISA was 100% in this study. Conclusion: m-EZN staining method can be used especially in immuncompromised patients with diarrhea as it is a rapid, cost-effective and easily applicable method for routinely diagnosis of Cryptosporidium parvum.

Anahtar Kelimeler

• Cryptosporidium parvum, ELISA, m-EZN, diarrhea.

İshalli Hastalarda Cryptosporidium Parvum\'un ELISA ve Modifiye Boyama Yöntemleriyle Araştırılması

Öz

Türkçe Özet:Amaç: Cryptosporidium türleri gelişmekte olan ve gelişmiş ülkelerde ishale neden olan parazitler arasında önemli bir yere sahiptir. Özellikle Cryptosporidium parvum, immün sistemi baskılanmış kişilerde ölümcül ishallere neden olabilmektedir ve ayrıca içme sularıyla taşınabildiği için halk sağlığını tehdit edebilmektedir. Bu çalışmada Cryptosporidium parvum\'un saptanması için kullanılan iki yöntemin karşılaştırılması amaçlandı. Yöntem: Bu çalışmada, Malatya Huzurevi sakinleri ile İnönü Üniversitesi Turgut Özal Tıp Merkezi\'ne başvuran ishalli toplam 92 kişiden alınan ishalli dışkı örneklerinde, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) yöntemiyle Cryptosporidium parvum koproantijenleri ve modifiye Ehrlich-Ziehl-Neelsen (m-EZN) boyama yöntemiyle ookistleri araştırılmış; iki yöntem istatistiksel olarak karşılaştırılmıştır. Bulgular: Toplam beş örnekte hem ELISA ile hem de m-EZN yöntemiyle pozitiflik saptanmıştır. ELISA yönteminin duyarlılığı ve özgüllüğü bu çalışmada %100 olarak saptanmıştır. Sonuç: Özellikle immün yetmezlikli ishalli hastalarda Cryptosporidium parvum tanısında hızlı, ucuz, kolay uygulanabilen bir yöntem olan m-EZN yönteminin rutin uygulamalarda kullanılabileceği düşünülmektedir.

Anahtar Kelimeler

• Cryptosporidium parvum, ELISA, m-EZN, ishal.

Kaynakça

1. Tumwine JK, Kekitiinwa A, Nabukeera N, Akiyoshi DE, Rich SM, Widmer G, Feng X, Tzipori S. Cryptosporidium parvum in children with diarrhea in Mulago Hospital, Kampala, Uganda. Am J Trop Med Hyg 2003;68(6):710-5.
2. Börekçi G, Otağ F, Emekdaş G. Mersin’de bir gecekondu mahallesinde yaşayan ailelerde Cryptosporidium prevalansı. Infeksiyon Derg 2005; 19( 1 ):39-46.
3. Yu JR, Lee JK, Seo M, Kim S, Sohn WM, Huh S, Choi HY, Kim TS. Prevalence of cryptosporidiosis among the villagers and domestic animals in several rural areas of Korea. Korean J Parasitol 2004;42(l):l-6.
4. Leach CT, Koo FC, Kuhls TL, Hilsenbeck SG, Jenson HB. Prevalence of Cryptosporidium parvum infection in children along the Texas-Mexico border and associated risk factors. (The American Society of Tropical Medicine and Hygiene ) Am J Trop Med Hyg 2000;62(5):656-61.
5. Otağ F, Aslan G, Emekdaş G, Aydın E, Özkan A.T, Çeber K. Mersin ilinde ilkokul öğrencilerinde Cryptosporidium spp. ookistlerinin araştırılması. T Parazitol Derg 2007;31 (1): 17-9.
6. Çeber K, Aslan G, Otağ F, Delialioğlu N, Öztürk C, Babür C, Emekdaş G. Mersin ilinde içme suyu, kullanma suyu, atık su ve deniz sularında Cryptosporidium spp. ookistlerinin araştırılması. T Parazitol Derg 2005;29(4):224-8.
7. Koturoğlu G, Bayram S, Kurugöl Z, Turgay N, Mutlubaş F. Akut ishalli çocuklarda Cryptosporidium sıklığı ve risk faktörleri. T Klin J Pediatr 2004;13:1-19.
8. Pereira MGA, Atwill ER, Barbosa AP, E Silva SA, Garcia-Zapata MTA. Intra-familial and extra-familial risk factors associated with Cryptosporidium parvum infection among children hospitalized for diarrhea in Goiâma, Goiâs, Brazil Am J Trop Med Hyg 2002;66(6): 787-93.

9. Nagamani K, Rajkumari A, Gyaneshwari. Cryptosporidiosis in a tertiary care hospital in Andhra Pradesh. Indian J Med Microbiol 2001 ;19(4):215-6.
10. Doğancı T, Araz E, Ensari A, Tanyüksel M, Doğancı L. Detection of Cryptosporidium parvum infection in childhood using various techniques. Med Sci Monit 2002;8(12):223-6.
11. Ramratnam B, Flanigan TP. Cryptosporidiosis in persons with HIV infection. Postgrad Med J 1997;73:713-6.
12. Nath G, Choudhury A, Shukla BN, et al. Significance of Cryptosporidium in acute diarrhoea in North-Eastern India. J Med Microbiol 1999;48:523-6.
13. Iqbal J, Munir MA, Khan MA. Cryptosporidium infection in young children with diarrhea in Rawalpindi, Pakistan. Am J Trop Med Hyg 1999;60:868-70.
14. Garcia LS, Shimizu RY, Novak S, Carroll M, Chan F. Commercial assay for detection of Giardia lamblia and Cryptosporidium parvum antigens in human fecal specimens by rapid solid-phase qualitative immunochromatography. J Clin Microbiol 2003;41(1):209—12.
15. Lee JK, Song HJ, Yu JR. Prevalence of diarrhea caused by Cryptosporidium parvum in non-HIV patients in Jeollanam-do, Korea. Korean J Parasitol 2005; 43(3): 111-4.
16. Khalakdina A, Vugia DJ, Nadle J, Rothrock GA and Colfort JM. Is drinking water a risk factor for endemic cryptosporidiosis? A case-control study in the immunocompetent general population of the San Francisco Bay Area. BMC Public Health 2003;3:11.
17. Moss DM, Bennett SN, Arrowood MJ, et al. Enzyme linked immunoelectrotransfer blot analysis of a cryptosporidiosis outbreak on a United States Coast Guard cutter. Am J Trop Med Hyg 1998;58:110-8.
18. Okhuysen PC, Chappell CL, Sterling CR, et al. Susceptibility and serologic response of healthy adults to reinfection with Cryptosporidium parvum. Infect Immun 1998;66:441-3.
19. Priest JW, Kwon JP, Moss DM, et al. Detection by enzyme immunoassay of serum immunoglobulin G antibodies that recognize specific Cryptosporidium parvum antigens. J Clin Microbiol 1999;37:1385-92.
20. Weitz JC. Detection of fecal Cryptosporidium parvum antigens using an ELISA technique. Rev Med Chil 1995;123:330-3.