The Effects of Systemic Infusion of Bradykinin on Experimental Peritoneal Fibrosis

Yıl 2014, Cilt: 36 Sayı: 1, - , 20.06.2015

Necdet Yasar Onur Uysal , Mehmet Oztop Canan Baydemır , Enver Ihtıyar

Öz

ABSTRACT: Background. Bradykinin (BK) is a proinflammatory peptide that is involved in the inflammation and vascular regulation. Recent studies have indicated that stimulation of BK-B2 receptors may attenuate fibrosis in renal and liver injuries and it is also expressed on neutrophils.Objectives. The aim of this study is to investigate the expression of bradykinin-B2 receptors and to explore the effects of systemic infusion of bradykinin (BK) using histochemical and immunohistochemical methods in a rodent model of chlorhexidine gluconate-induced peritoneal fibrosis.Materials and Methods. In this experimental study, twenty-four male Sprague-Dawley rats (n=24) were divided into three groups; Control, Chlorhexidine Gluconate (CG) and Chlorhexidine Gluconate+Bradykinin treatment (CG+BK). All animals were euthanized at day 21 and peritoneal tissue samples were taken under anesthesia induced by 50 mg/kg s.c. sodium pentothal. Histological assessments were then performed using hematoxylin and eosin, Periodic Acid-Schiff staining; and antibodies against TGF-β1, MMP-2, PAI-1 and bradykinin-B2 (BK-B2) receptors.Results. Thickness of submesothelial layer, neovascularization, polimorphonuclear granulocytes and fibrosis increased in the CG+BK treatment group. While expression of TGF-β1, MMP-2 and PAI-1 was not significantly different than that of the CG group. Staining of BK-B2 receptors was up-regulated in the submesothelial compact zone of the CG+BK treatment group.Conclusions. The results of our study showed that the stimulation of BK-B2 receptors by systemic BK perfusion did not have any antifibrotic effects in the encapsulating peritoneal sclerosis rat models, and actually, it may even promote fibrosis by aggravating inflammation.

KEY WORDS: peritoneal fibrosis, TGF-β1, MMP-2, PAI-1, BK-B2 receptors

 

ÖZET: Bu çalışmanın amacı klorheksidin glukonat ile oluşturulan rodent peritoneal fibrozis modelinde bradikinin-B2 reseptör ekspresyonunun araştırılması ve sistemik bradikinin infüzyonunun etkisinin histokimyasal ve immünhistokimyasal metodlarla ortaya konulmasıdır. Bu deneysel çalışmada, 24 Sprague-Dawley cinsi rat 3 gruba ayrıldı; Kontrol, Klorheksidin Glukonat (KG) ve Klorheksidin Glukonat + Bradikinin tedavisi (KG+BK). Kontrol grubunda ratlara günlük serum fizyolojik (10 mL/kg i.p.) verildi. KG ve KG+BK gruplarında peritoneal fibrozis, 3 hafta boyunca günlük, 10mL/kg dozunda serum fizyolojik içinde çözülen %0.1 KG ve %15 etanol i.p. enjeksiyonları ile oluşturuldu. KG grubunda ratlara serum fizyolojik infüzyonu (0.25 µL/h) verilirken, KG+BK tedavisi grubunda ratlara 3 hafta boyunca ozmotik mini pompalar vasıtasıyla serum fizyolojik içinde çözülmüş bradikinin (100 ng/kg/min) subkutan verildi. Tüm hayvanlar i.p. enjeksiyonlarının 21. Gününde, önceki gece yiyecek ve su kesildikten sonra 50mg/kg s.c. sodyum pentotal anestezisi altında sakrifiye edildi ve peritoneal örnekler alındı. Histolojik değerlendirme hematoksilen- eozin ve Periodik Acid-Schiff boyaları kullanılarak; immünhistolojik değerlendirme TGF-β1, MMP-2, PAI-1 ve bradikinin-B2 (BK-B2) reseptörleri antikorları kullanılarak ışık mikroskobisi altında yapıldı. Submezotelyal tabakanın kalınlığı, neovaskülarizasyon, polimorfonükleer granülositler ve fibrozis KG+BK tedavisi grubunda artmışken,  TGF-β1, MMP-2 ve PAI-1 ekspresyonu KG grubuna kıyasla anlamlı bir farklılık göstermedi. BK-B2 reseptör boyaması KG+BK tedavi grubunda submezotelyal kompakt zonda artmıştı. Çalışmamızın sonuçları sistemik BK perfüzyonu ile stimüle edilen BK-B2 reseptörlerinin enkapsüle peritoneal sklerozis rat modelinde herhangi bir antifibrotik etkilerinin olmadığını ve aslında inflamasyonu daha da artırarak fibrozisi daha da artırabileceğini göstermektedir.

ANAHTAR KELİMELER: bradikinin, klorheksidin glukonat, peritoneal fibrozis, TGF-β1,       MMP-2, PAI-1, BK-B2 reseptörleri, rat

Anahtar Kelimeler

ANAHTAR KELİMELER: bradikinin, klorheksidin glukonat, peritoneal fibrozis, TGF-β1