Antibacterial Activity of Muscid and Myiasis Flies Larval Secretions

Öz

Maggot therapy is a method based on the use of myiasisfly larvae also called maggot which affinity necrotic tissue in wound treatment. In this study, it was aimed to determine the antibacterial activity some muscid and myiasis flies larvae secretions in vitro. Investigation of the effects of antibacterial compounds produced by the fly larvae secretions have become important with the increasing of antibacterial-resistant bacteria strains. In this study, Lucilia sericata, Chrysomya albiceps, Calliphora vicinaand Musca domesticaflies catched and placed in the cage to provide feeding and laying. After disinfected the eggs was transferred to sterile medium including sheep blood agar (5 %) and incubated overnight at 25 °C. After hatched, larvae were kept in the medium for 2-3 days and disinfected, incubated overnight at 25 °C in steril bi-distilled water (ddH₂O). After incubation, the liquid which containing larval secretions, centrifuged and sterilized by filtration (0.2 µm) that bacteria could not pass through. Staphylococcus aureus, MRSA ATCC 43300, E. coliand P. aeruginosathe suspension of bacteria  spreaded petri dishes including MHA sterile-medium. Secretions amount of 30 µl obtained from larvae  was impregnated blank antibiotic discs and were placed in the MHA medium and then incubated overnight at 35 °C.When the results were examined, antibacterial activitywere not detected againstGram-negative E. coliand P. aeruginosabacterial strainsat thelarval secretions of muscid and myiasis flies, antibacterial activitywas detected against Gram-positive S. aureusbacterial strain. While antibacterial activity was not detected against Gram-positive MRSA ATCC 43300 bacterial strain the larval secretion of muscidfly,antibacterial activity were detected the larval secretions of myiasis flies.In conclusion, the antibacterial activities of muscid and myiasis fly larval secretionswere showed and it is suggested that studies regarding this field can be investigated by using different method and medium.

Anahtar Kelimeler

• Maggot therapy,Muscid and myiasis,Larvae,Secretion,Antibacterial activity

Muskid ve Miyaz Sinekleri Larva Salgılarının Antibakteriyel Etkileri

Öz

Maggot terapi, nekrotik dokulara affinite duyan maggot adı da verilen miyaz sinek larvalarının yara tedavisinde kullanımına dayalı bir metottur. Bu çalışmada, muskid ve miyaz sinek larvalarından elde edilen salgıların in vitro ortamda antibakteriyel etkilerinin belirlenmesi amaçlanmıştır. Antibiyotiklere dirençli bakteri suşlarındaki artışla birlikte sinek larvaları tarafından üretilen antibakteriyel bileşenlerin etkilerinin araştırılması da önemli hale gelmiştir. Çalışmada Lucilia sericata, Chrysomya albiceps, Calliphora vicina ve Musca domestica sinekleri yakalanarak kafes düzeneğine konulduktan sonra beslenmeleri ve yumurtlamaları sağlandı. Elde edilen yumurtalar dezenfekte edildikten sonra % 5 koyun kanlı agar steril besi ortamına aktarılarak bir gece boyunca 25 °C’de inkübe edildi. Yumurtadan çıktıktan sonra besi ortamında 2-3 gün bekletilen larvalar dezenfekte edilerek steril bidistile su (ddH₂O) içerisinde 25 °C’de bir gece inkübe edildi. İnkübasyon işleminden sonra larva salgılarını içeren sıvı santrifüj edilip bakterilerin geçemeyeceği 0.2 µm’lik filtreden geçirilerek steril edildi. Staphylococcus aureus, Metisilin-dirençli S. aureus (MRSA) ATCC 43300, Escherichia coli ve Pseudomonas aeruginosa bakteri süspansiyonları Mueller Hinton Agar (MHA) steril besi ortamı bulunan petri kutularına yayıldı. Boş antibiyotik disklerine 30 µl miktarında emdirilen larva salgıları MHA besiyerine konuldu ve 35 °C’de bir gece inkübasyona bırakıldı. Sonuçlar incelendiğinde muskid ve miyaz sinekleri larva salgılarında Gram-negatif E. coli ve P. aeruginosa bakteri suşlarına karşı antibakteriyel etki tespit edilemezken, Gram-pozitif S. aureus bakteri suşuna karşı antibakteriyel etki tespit edildi. Gram- pozitif MRSA ATCC 43300 bakteri suşuna karşı ise miyaz sinekleri larva salgılarında antibakteriyel etki tespit edilirken, muskid sinek larva salgısında antibakteriyel etki tespit edilemedi. Sonuç olarak, muskid ve miyaz sinek larva salgılarının antibakteriyel etkileri gösterilmiş olup, konuyla ilgili çalışmaların farklı metot ve besiyerleri kullanılarak karşılaştırmalı çalışılmasında yarar görülmektedir. 

Anahtar Kelimeler

• Maggot terapi,Muskid ve miyaz,Larva,Salgı,Antibakteriyel etki

Kaynakça

1. Bexfield A, Nigam Y, Thomas S, Ratcliffe NA, (2004). Detection and partial characterization of two antibacterial factors from the excretions/secretions of the medicinal maggot Lucilia sericata and their activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Microbes Infect, 6, 1297–1304.
2. Bonn D, (2000). Maggot therapy: an alternative for wound infection. Lancet, 356, 1174.
3. Doğandemir G, (2010). Lucilia sericata’nın Kronik Yaralarda Kolonize Olan Mikroorganizmalar Üzerindeki Antimikrobiyal Etkinliğinin Araştırılması. Tıpta Uzmanlık Tezi, Genelkurmay Başkanlığı Gülhane Askeri Tıp Akademisi, Askeri Tıp Fakültesi, Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı Başkanlığı, Ankara.
4. Jaklic D, Lapanje A, Zupancic K, Smrke D, Gunde-Cimerman N, (2008). Selective antimicrobial activity of maggots against pathogenic bacteria. J Med Microbiol, 57 (5), 617 - 625.
5. Kerridge A, Lappin-Scott H, Stevens JR, (2005). Antibacterial properties of larval secretions of the blowfly, Lucilia sericata. Med Vet Entomol, 19, 333–337.
6. Kettle DS, (1990). Medical and Veterinary Entomology. CAB International, Wallingford.
7. Polat E, Kutlubay Z, (2014). Meglümin Antimoniat Tedavisine Dirençli Dört Kutanöz Leishmaniosis Olgusu. Turkiye Parazitol Derg, 38, 177-80.
8. Sherman RA, Grassberger M, Gileva OS, Kim CMH, Mumcuoğlu KY (Editors), (2013). Biotherapy - History, Principles and Practice, Springer Science+Business Media Dordrecht.

9. Sherman RA, Hall MJ, Thomas S, (2000). Medicinal maggots: an ancient remedy for some contemporary afflictions. Annu Rev Entomol, 45, 55–81.
10. Soulsby EJL, (1986). Helminths, arthropods and protozoa of domesticated animals. Bailliere Tindall, London.
11. Zumpt F, (1965). Myiasis in man and animals in the old world. Butterwoths & Co. ltd. London.