Combined use of ion-exchange chromatography and ethanol fractionation in purification of canine and feline plasma albumin

Öz

 Albumin is the most abundant protein in a plasma having numerous roles in both health and disease. Along with regulating the oncotic pressure, albumin transports free fatty acids, bilirubin, heavy metal ions, hormones, vitamins and many organic molecules having a biological function. Any level of deficiency in albumin levels ultimately leads to serious disturbances in metabolism. Thus, purified human albumin solutions frequently used in human medicine. Even the function of the albumin is similar across the species, the antigenic diversity comes as a limiting factor for its possible use in veterinary medicine. In our study, we purified albumin from the plasma pool of cat and dogs. The individual samples are taken from the animals that are admitted to the faculty clinics and found to be healthy according to the clinical investigation. The ion chromatography followed by ethanol precipitation technique was utilized for the purification process. The combined procedure allowed to purify albumin in each species greater than 95%. It is thought that this approach can also be used for therapeutic purposes in veterinary medicine to overcome the limitations of using purified human albumin.

Anahtar Kelimeler

• Albumin,ion-exchange chromatography,purification

Kedi ve köpek plazma albümin saflaştırılmasında iyon değişim kromatografisi ve etanol çöktürme tekniğinin birlikte kullanımı

Öz

 Plazma proteinlerinin büyük bir bölümünü oluşturan albüminin hastalıkta ve sağlıkta bilinen birçok görevi mevcuttur. Bu görevler arasında kan onkotik basıncınının sağlanması yanında serbest yağ asitleri, bilirubin, çeşitli ağır metaller, hormonlar, vitaminler ile önemli biyolojik fonksiyona sahip çok sayıda madde ve molekülün taşınması vardır. Albüminin çeşitli sebepler ile meydana gelen eksikliği önemli fonksiyon bozukluklarına neden olmaktadır. Bu nedenle beşeri hekimlikte tedaviye yönelik saflaştırılmış plazma albümini sıklıkla kullanılmaktadır. Bununla beraber albümin farklı türlerde benzer fonksiyonlar göstermesine rağmen antijenik farklılıklar insan albümininin veteriner hekimlikte kullanımını büyük oranda kısıtlamaktadır. Yaptığımız çalışmada, kedi ile köpek EDTA’lı plazmalardan oluşturulan farklı havuz örneklerinde albümin saflaştırılması gerçekleştirilmiştir. Kullanılan örnekler fakülte kliniklerine rutin kontrol için gelen ve klinik inceleme sonuçlarına göre sağlıklı olduğu tespit edilen hayvanlardan elde edilmiştir. Saflaştırma aşaması iyon değişim kromatografisi ve etanolde çöktürme tekniğinin kombine olarak kullanılması ile gerçekleştirilmiş ve her iki tür için en az %95 saflıkta albümin elde edilmiştir. Yapılan bu çalışma ile elde edilen albüminin veteriner hekimlik alanında tedavide kullanılabileceği ve insan albümin kullanımının yarattığı olumsuzlukların giderileceği düşünülmektedir.

Anahtar Kelimeler

• Albümin,saflaştırma,iyon değişim kromatografisi

Kaynakça

1. .