The Investigation of Mycobacterium Bovis in Raw Milk Samples in Düzce Province

Öz

Aim: Human tuberculosis caused by Mycobacterium bovis (M. bovis) is an important public health problem, especially in developing countries. M. bovis infections are often transmit from animal to human, rarely human to human. Contamination is achieved by raw consumption of contaminating milk and by the inhalation of contaminant aerosols. Tuberculosis cases caused by M. bovis were detected in a previous study conducted in our region. Therefore, it was aimed to investigate the presence of M. bovis in raw cattle milk samples in our study.

Materials and Methods: In the study, raw milk sample collected randomly from 100 different cattle from five villages in Düzce province were examined, between 12-19 May 2017. Mycobacteria was investigated by Ehrlich-Ziehl-Neelsen staining method, culture on Löwenstein-Jensen agar, Middlebrook 7H11 agar and Mycobacteria Growth Indicator Tube medium, in these samples. In the case of presence of acid-resistant bacilli, it is planned to classify by conventional and molecular methods. Further, the maintenance conditions of cattle were observed.

Results: When the incubation was complete, no acid-resistant bacilli were found in any of the colonies detected in 22 different milk samples, by Ehrlich-Ziehl-Neelsen and Gram stain. Gram positive bacilli, cocci and yeast were detected as contaminants. It was observed that the cattle in the ranch were in proper conditions.

Conclusion: As a result, it was observed that the maintenance of the cattle was good in the villages in our province and cattle milks did not contain Mycobacterium. Because of the M. bovis cases previously identified in the region, it was thought that the study should be carried out in the fattening cattle as well.

Anahtar Kelimeler

• Mycobacterium bovis,milk,tuberculosis

Düzce İlinde Çiğ Süt Örneklerinde Mycobacterium Bovis Aranması

Öz

Amaç: Mycobacterium bovis (M. bovis) kaynaklı insan tüberkülozu özellikle gelişmekte olan ülkelerde önemli bir halk sağlığı sorunudur. M. bovis enfeksiyonları çoğunlukla hayvandan insana, çok nadiren de insandan insana bulaşabilmektedir. Bulaşma kontamine sütlerin çiğ olarak tüketilmesi ve kontamine aerosollerin solunması ile gerçekleşmektedir. Bölgemizde daha önce yapılan bir araştırmada M. bovis enfeksiyonlu tüberküloz olguları saptanmıştır. Bu nedenle, çalışmamızda, çiğ sığır sütü örneklerinde M. bovis varlığının araştırılması amaçlanmıştır.

Gereç ve Yöntemler: Çalışmada, 12-19 Mayıs 2017 tarihleri arasında Düzce ilindeki beş köyde bulunan 100 ayrı sığırdan rastgele olarak toplanan çiğ süt örneği incelenmiştir. Bu örneklerde mikobakteri varlığı Ehrlich-Ziehl-Neelsen boyama yöntemi, Löwenstein-Jensen agar, Middlebrook 7H11 agar ve Mycobacteria Growth Indicator Tube besi yerinde kültür yapılarak araştırılmıştır. Aside dirençli basil görülmesi durumunda konvansiyonel ve moleküler yöntemler ile tiplendirme yapılması planlanmıştır. Ayrıca hayvanların bakım şartları da kaydedilmiştir.

Bulgular: İnkübasyonu tamamlanan besiyerlerinde, 22 ayrı süt örneğinde saptanan kolonilerden Ehrlich-Ziehl-Neelsen ve Gram boyama sonucu hiçbirinde aside dirençli basil saptanmamıştır. Kontaminant olarak değerlendirilen Gram pozitif basil, kok ve maya üremesi saptanmıştır. Hayvanların ahırlarda ortalama 2-5’li olarak genellikle de temiz bir şekilde bakıldığı gözlenmiştir.

Sonuç: Sonuç olarak ilimizde köylerde yetiştirilerek sütü kullanılan sığırların bakımlarının iyi olduğu ve sütlerin de Mycobacterium içermediği gözlenmiştir. Bölgede daha önce saptanan M. bovis olgularının olmasından dolayı çalışmanın besi hayvanlarında da yapılmasının gerektiği düşünülmüştür.

Anahtar Kelimeler

• Mycobacterium bovis,süt,tüberküloz

Kaynakça

1. 1. Rastogi N, Legrand E, Sola C. The mycobacteria: an introduction to nomenclature and pathogenesis. Rev Sci Tech. 2001; 20(1): 21- 54.
2. 2. Holloway KL, Henneberg RJ, de Barros Lopes M, Henneberg M. Evolution of human tuberculosis: a systematic review and meta-analysis of paleopathological evidence. Homo. 2011; 62(6): 402-58.
3. 3. Portillo-Gómez L, Sosa-Iglesias EG. Molecular Identification of Mycobacterium bovis and the importance of zoonotic tuberculosis in mexican patients. Int J Tuberc Lung Dis. 2011; 15(10): 1409-14.
4. 4. Öztürk CE, Şahin İ, Öksüz Ş, Kılıç N, Kılınçel Ö, Aydın L, ve ark. Düzce ilinde izole edilen Mycobacterium tuberculosis kompleks suşlarında Mycobacterium bovis subsp. bovis varlığının araştırılması. Mikrobiyol Bul. 2016; 50(3): 392-400.
5. 5. de la Rua-Domenech R, Goodchild AT, Vordermeier HM, Hewinson RG, Christiansen KH, Clifton-Hadley RS. Ante mortem diagnosis of tuberculosis in cattle: a review of the tuberculin tests, gamma-interferon assay and other ancillary diagnostic techniques. Res Vet Sci. 2006; 81(2): 190-210.
6. 6. Botsaris G, Slana I, Liapi M, Dodd C, Economides C, Rees C, et al. Rapid detection methods for viable Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in milk and cheese. Int J Food Microbiol. 2010; 141(suppl 1): 87-90.
7. 7. World Health Organization. Global tuberculosis report. Geneva: WHO; 2016.
8. 8. Thakur A, Sharma M, Katoch VC, Dhar P, Katoch RC. A study on the prevalence of bovine tuberculosis in farmed dairy cattle in Himachal Pradesh. Veterinary World. 2010; 3(9): 409-14.

9. 9. Jha VC, Morita Y, Dhakal M, Besnet B, Sato T, Nakai A, et al. Isolation of Mycobacterium spp. from milking buffaloes and cattle in Nepal. J Vet Med Sci. 2007; 69(8): 819-25.
10. 10. Raffo E, Steuer P, Monti G, Salgado M. Effect of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) infection on the diagnostic accuracy for Mycobacterium bovis (M. bovis) infection under field conditions in cattle belonging to low M. bovis prevalence herds. Trop Anim Health Prod. 2017; 49(4): 771-5.
11. 11. Srivastava K, Chauhan DS, Gupta P, Singh HB, Sharma VD, Yadav VS, et al. Isolation of Mycobacterium bovis & M. tuberculosis from cattle of some farms in North India - possible relevance in human health. Indian J Med Res. 2008; 128(1): 26-31.
12. 12. Lamuka PO, Njeruh FM, Gitao GC, Matofari J, Bowen R, Abey KA. Prevalence of bovine and avian tuberculosis in camel herds and associated public health risk factors in Isiolo country, Kenya. Trop Anim Health Prod. 2018 ;50(5): 937-45.
13. 13. Kazwala RR, Daborn JC, Kusıluka LJM, Jiwa SFH, Sharp JM, Kambarage DM. Isolation of Mycobacterium species from raw milk of pastoral cattle of the southern highlands of Tanzania. Trop Anim Health Prod. 1998; 30(4): 233-9.
14. 14. Ünver A, Atabay Hİ, Güneş V, Çitil M, Erdoğan HM. Kars yöresinde sığır tüberkülozunun yaygınlığının pcr ile belirlenmesi. Kafkas Üniv Vet Fak Derg. 2007; 13(1): 27-31.
15. 15. Konuk M, Korcan E, Dülgerbaki S, Altındiş M. Isolation and ıdentification of mycobacteria from raw milk samples in Afyonkarahisar district of Turkey. Int J Food Microbiol. 2007; 115(3): 343-7.
16. 16. Gümüşsoy KS, Atasever A, Aydın F, Özcan M, Beyaz L, Hızlısoy H, ve ark. Prevalence of tuberculosis in cattle in Turkey. Medycyna Wet. 2007; 63(3): 305-8.
17. 17. Aydın FE, Ülger M, Emekdaş G, Aslan G, Günal S. Mersin ilinde çiğ sütlerden Mycobacterium bovis ve tüberküloz dışı mikobakterilerin izolasyonu ve tanımlanması. Mikrobiyol Bul. 2012; 46(2): 283-9.