Sığır ve Koyun Mastitislerinden İzole Edilen Escherichia Coli'lerin Çeşitli Özelliklerinin Araştırılması

Öz

Sığır ve Koyun Mastitislerinden izole Edilen Escherichia coli'lerin Çeşitli Özelliklerinin Araştırılması Bu çalışmada, mastitisli inek ve koyunlara ait süt, rektal svap ve altlık örneklerinden izole edilen Escherichia coli suşlarının biyokimyasal özellikleri ve bazı virülens faktörleri yönünden karşılaştırılması amaçlandı. Bu amaçla, süt inekçiliği yapılan 25 işletmeden 845 süt, 215 rektal svap ve 25 altlık örneği alındı. Süt örneklerinin Somatik Hücre Sayıları belirlenerek SHS 150x 10 /ml ve üzerinde bulunan 243 süt örneği ile bu hayvaniara ait 55 rektal svap ve 25 altlık örneği ve 10 koyun ünitesinden 1300 süt örneğine Kalifornia Mastitis Test uygulanarak CMT pozitif olan 170 süt ve bu hayvalara ait 85 rektal svap ve 10 altlık örneği İ zo lasyon çalışmalarında kullanıldı. İzole edilen tüm suş l ar biyokimyasal testlerle identifıye edildi. İnekleri n ve koyunların süt, rektal svap ve altlık örneklerinden izole ve identifiye edilen sırasıyla 68 ve 36 E. coli suşu hemaglutinasyon özelliği , serum dirençliliği , kolisin aktivitesi, enteropatojenite ve enterotoksijenite yönünden test edildi. Bu çalışmada, ineklere ve koyunlara ait süt örneklerinden sırasıyla %16,4 ve %14,8 oranlarında koliform bakteri izole edildi. İnek ve koyun sütlerinden izole edilen koliform bakterilerin ise sırasıy la %91 ,9'unun ve %87'sinin E. coli olduğu saptandı. inek rektal svap örneklerinin %87,3 'ünden ve altlık örneklerinin %80'inden, koyun rektal svap örneklerinin %82,4' ünden, atlık örneklerinin %80' inden E. coli izole ve identifiye edildi. Altınışsekizi ineklere, 36 'sı koyunlara ait olmak üzere izole ed ilen toplam 104 E. coli suşu kobay, tavşan ve sığır eritrostleriyle sırası y la %16,4, %11 ,5 ve %4,8 oranlarında Mannoz Sensitiv Hemaglutinasyon verdi, diğer hayvaniara ait eritrositlerle MSHA oranları düşüktü. Suşların yaklaşık % 1 ' i sığır, tavşan ve %5,8' i kobay eritrositleri ile MRHA verirken koyun eritrositleri ile Mannoz Rezistan Hemaglutinasyon vermedi ve E. coli suşları 11 hemaglutinasyon formülü oluşturdu. E. coli suşl arının %98, I' inin sığır serumuna dirençli, %1 ,9' unun kolisin aktif ve %4,8 ' inin kolisin aktif suşlara karşı duyarlı , %45,8' inin enteropatojenik ve %16,2's inin enterotoksijenik olduğu belirlendi. Sonuç olarak, mastitisli hayvaniara ait materyallerden izole edilen E. coli suşları virulens faktörleri yönünden farklılıklar gösterdiklerinden, serum dirençliliği dışında incelenen faktörlerin ınastitisin patogeneziyle doğrudan ilişkili olmadığı kanaatine varıldı.

Anahtar Kelimeler

• Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi
• Sığır
• Koyun
• Mastitis
• Escherichia Coli
• 2001

In Vestigation of Variaus Characteristics of E. coli Isolated From Cattle and Sheep Mastitis

Öz

lnvestigation of Various Characteristics of E. co li Isolated From Cattle and Sheep Mastitis. The aim of this study was to compare the biochemical characteristics and same virulence factors of Escherichia coli strains isolated from milk, rectal swap and litter samples of mastitic cows and sheep, For this purpose, 845 milk, 215 rectal swap and 25 litter samples were collected from 25 dairy establishments. After determining S omatic Culture Counturing, 243 mi lk, with 150 103 / ml and 55 rectal swaps and 25 litter samples of the cows, and after performing California Mastitis Test in 1300 milk samples collected from 10 dairy sheep establishments, 170 CMT positive mil k, 85 rectal swap and 10 litter samples were u sed for isolation. All of the isolated strains were identified with biochemical tests. 68 and 36 E. coli strain isolated and sheep milk, rectal swap and litter respectively were tested for the haemagglutinating activity, resistance to serum, colicine activity, enterpathogenicity and enterotoxigenicity. In this study, 16,4% and 14,4% of coliform bacteria were isolated from the milk of cows and sheep respectively. The rat i o of E. coli in coli form bacteria were 91 ,9% and 87% of the isolates from co w and sheep respectively. E. coli was isolated ata ratio of 87,3% of rectal swap and 80% of litter of cows, and 82,4% of rectal swap and 80% of litter of sheep. A total of 104 E. coli strains consisting of 68 from cows and 36 from sheep were Mannose Sensitive Hemaglutinasyon positive for guineapig, rabbit and cattle erythrocytes ata ratio of 16,4%, 11 ,5% and 4,8% respectively, the MSHA rations were lower with the erythrocytes of other animal species. While approximately 1 % of strains were Mannose Resistance Hemaglutinasyone positive with cattle, rabbit and %5,8 guineapig erythrocytes. All ofthe strains were MRHA negative with sheep erythrocytes and E. coli strains gave 11 haemagglutination formulas. It was found that 98,1 of E. coli strains were resİstant to cattle serum, 1,9% were colicinogenic and 4,8% were sensitive to colicinogenic strains, 45,8% were enteropathogenic and 16,2% were enterotoxigenic. In conclusion, because isolated E. coli strains showed different patterns for the investigated virulence factors except resistance to serum, these factors have no direct relationship w ith the path o genesis of masitis.

Kaynakça

1. ANDERSON JC, BURROWS MR, BRAMLEY AJ (1977): Bacterial adherence in mastitis caused by E.coli. Vet Pathol, 14: 618-628.
2. ARDA M, MİNBA YA, A YDlN N, AKA Y Ö, İZGÜR M, LELOGLU N, KAHRAMAN M, ILGAZ A, DiKER KS ( 1997). Özel Mikrobiyoloji. 4. Baskı , Ankara: Medisan Yayın Evi, s. 45-47.
3. ARSLAN N (1981). Elazığ bölgesi koyunlarında mastitis ' in etiyolojisi üzerine araştırma. Uzmanlık Tezi. Elazığ Vet Kont Araş Enst.
4. ATEŞ M, ERGANİŞ O, KAYA O, ÇORLUM (1990). Koyun masıilisleri üzerinde riıikrobiyolojik incelemeler. Selçuk Üniv Vet Fak Derg, 6-7: 3-6.
5. ATEŞ M, ERGANİŞ O, ÇORLU M. (1991). Konya yöresindeki mastitis'li ineklerden elde edilen süt örneklerinin mikrobiyel florası ve LDH aktivitesi. Doğa Tr J Vet Anim Sci, 16: 19-29.
6. AYDIN N, COŞKUNER MR (1982-1983). Ankara bölgesinde klinik ve subklinik mastitislere neden olan aerobik mikroorganizmaların ve mantarların izolasyon identifikasyon ve antibiyotiklere karşı duyarlılıklarının saptanması üzerinde çalışmalar. Etlik Vet Mikrob Enst Derg, 5: 7-28.
7. AYHAN H (1985). İnsan ve hayvanlardan izole edilen Eschericlıia coli suşlarının biyokimyasal, antibiyotiklere duyarlılık ve kolisin plazmidi taşıma özellikleri üzerinde incelemeler. Yüksek Lisans Tezi Ankara Üniv Vet Fak
8. AYHAN H, AYDIN N (1989). İnsan ve hayvanlardan izole edilen Esclıerichia co/i suşlarının kolisin plazmidi taşıma özellikleri üzerinde incelemeler. Etlik Vet Mikrob Derg, 6: 91-99.

9. BARROW PA, HILL AW (1989). The virulence characteristics of strains of Esclıericlıia co/i isolaıed from cases of bovine mastitis in England and Wales. Vet Microbiol, 20: 35-48.
10. BATU A (1979). Sığır mastitisi. Pendik Vet Mikrob Derg, 11: 80-122.
11. BATU A, DURAK Ö, FIRAT G (1979). Marmara ve Trakya bölgesi süt ineklerinde klinik ve subklinik mastitisler ve etkenleri ile bu etkenierin antibiyotiklere duyarlılıklarının tesbiti üzerinde araştırma . Pendik Vet Mikrob Derg, 11: 25-40.
12. BLANCO M, BLANCO J, BLANCO JE, RAMOS J (1993). Enterotoxigenic, verotoxigenic, and necrotoxigenic Eschericlıia coli isolated from cattle in Spain. Am J Vet Res, 54: 1446-1451.
13. CARROLL EJ, JASPER DE (1977). Bactericidal activity of standard bovine serum against colifom bacteria isolaıed from udders and the environment of dairy cows. Am J Vet Res, 38: 2019-2022.
14. CLEGG S, GER LA CH GF ( 1987). Enterobacterial fimbria. J Bacteriol, 169: 934- 938.
15. DEUTZ A, A W AD-MASALMEH M, KÖFER J ( 1995). Characteristics of E. coli involved in bovine mastitis. Proceedings of the Third IDF International Mastitis Seminar. TelAviv, 28 May- 1 June I 995, Sess.6, p.:80-81.
16. DiKER S (1984). Koliform mastitisler, 1. Mastitis Semineri. Lalahan Veteriner Zootekni Araşt ı rma Enstitüsü Yetiştirıne ve Deneme Çiftliği Müdürlüğü Ofset Tesis leri, Ankara. S.: 17-79.
17. DiKER S, İSTANBULLUOGLU E (1980). Tavuklardan izole edilen Escherichia coli suşlarının biyokimyasal, colisin, karakterleri ve antibiyotik lere lizojenik duyarlılık oranları üzerinde incelemeler. Ankara Üniv Vet Fak Derg, 27: 484-490.
18. ERER H, ATEŞ M, KAYA O, KlRAN MM, SERKİN · Ş (1990). Koyun mastitisleri üzerinde patolojik ve bakteriyolajik incelemeler. Etlik Vet Mikrob Derg, 6: 79-93.
19. ERGANİŞ O (1987). Bindilerin fekal florasından izole ed ilen E. coli suşlarının bazı patojenite özellikleri üzerinde ·incelemeler. Doktora Tezi. Selçuk Üniv. Vet. Fak"
20. ERGANİŞ O, ATEŞ M, KAYA O, ÇORLU M ( 1987). Konya bölgesindeki ishalli buzağılardan izole edi len E. coli'Ierin biyokimyasal , serolojik, hemaglutinasyon ve enteropatojenik, özellikleri üzerinde araşt ırma lar. TÜBİTAK Veterinerlik ve Hayvancılık Araştırma Grubu Proje No:VHAG-687.
21. HOGAN JS, TODHUNTER DA, SMITH K, SCHOENBERGER PS (1990a): Hemagglutination of bovine and guinea pig erythrocytes by Escherichia coli isolated from bovine intramammary infections. J Dai1y Sci, 73: 188.
22. HOGAN JS, TODHUNTER DA, SMITH KL, SCHOENBERGER PS (1990b). Hemagglutination and hemolysis by Eschericlıia co/i isolated from bovine intramammary infections. J Dairy Sci, 73: 3126-3131.
23. İSTANBULLUOGLU E (1978). Septicaenıia neonatoriunılu buzağılardan izole edilen Esclıerichia coli suşlarının biyokimyasal, serolojik, enterotoksijenik, antibiyotiklere duyarlılık, bulaşıcı tip plasmid (R-faktör) taşıma özellikleri ile enfekte ve normal buzağılardan elde edilen serum örneklerinin immuno globulin (IgG,IgA,IgM) miktarları üzerinde incelemeler. Doçentlik Tezi . Ankara Üniv Vet Fak.
24. İSTANBULLUOGLU E, DiKER S ( 1980). Septicaemia neonatoriumlu buzağılardan izole edilen Eschericlıia co/i su ş larının biyokimyasal , enterotoksijenik, antibiyotiklere duyarlılık, plasmid taşıma ve lizojenik özellikleri üzerinde incelemeler. Ankara Üniv Vet Fak Derg, 27: 474-483.
25. İZGÜR M (1981). Sağlıklİ koyunlardan izole edilen . E. coli suşlarının çeşitli özellikleri üzerinde incelemeler. Doktora Tezi. Ankara Üniv Vet Fak.
26. İZGÜR M, İSTANBULLUOGLU E (1982). Sağlıklı koyunlardan izole edilen Escherichia coli suşlarının çeşitli özellikleri üzerinde incelemeler. Doğa Vet Hay Tar Orm 6: 29-34.
27. İZGÜR M (1983). Kolisinler.Ankara Üniv Vet Fak Derg, 30 : 234-241.
28. JONES TO (1990). Eschericlıia coli mastitis in dairy cattle- A review of the literature. Vet Bull, 60: 205-231.
29. KAECKENBEECK A (1993). Le diagnostic des souches pathogenes d 'Eschericlıia coli: pelites et grandes histoires. Ann Med Vet, 137: 337-340.
30. KAYA O, ERGANİŞ O, KUYUCUOGLU Y (1993 ). İn ek mastitislerine sebep olan mikroorganizmalar ve antibiyotiklere duyarlılıkları. Tiirk Vet Hek Derg, 5:49-51.
31. KULCSAR M, GACS M, HUSZENİCZA GY, KEGL T, JONSSON P (1995). Ineidence of mastitis of di fferent bacteriological background in seven large-scale dairy herds in Hungary. Proceedings of the Third IDF International Mastitis Seminar 28 may-1 June 1995, Tel-Aviv, Israel Sess.6 p .: 80-81.
32. KROGFEL T KA (I 99 I). Bacterial adhesion: genetics, biogenesis. And role in pathogenesis of fımbri al adhesins of Esclı e ric!ıia co/i. Rev lnfect Dis, 13: 721-735. LASSEN J ( 1975) Rapid identifıcation of gram-negative rods using a three- tube methods combined with a dichotomic key. Acta Pathal Mikrobiol Scand Sect B, 83: 525- 533.
33. LIPMAN LJA,LAM TJGM, NIJS A, SCHUKKEN YH, GAASTRA W (1995). Comparison of Staphylococcus aureus strains and Escherichia coli strains isolated from bovine mammary glands and implications for epidemiological studies on mastitis. Proceedings of the third IDF International Mastitis Seminar 28 may- I June 1995, Tel Aviv, Israeı Sess.6 p .: 28-32.
34. NEMETH, J., MUÇKLE, A.M. , REGGIE, Y.C. (1991). Serum resistance and the traT gene in bovine . mastitis-causing Eschericlıia co li. Vet Microbiol, 28: 343-351.
35. NEMETH, J., MUCKLE, C.A., GYLES,C.L. (1994 ). In vitro comparison of bovine mastitis and fecal Eschericlıia coli isolates. Vet Microbiol, 40: 231-238.
36. OBI SKC, CAMPBEL JA (1978). Ineidence of colicinogenic Esclıerichia coli in sheep, goats and cattle. Zbl. Vet Med B, 25: 652-656.
37. OU SAID AM, CONTREPOIS MG, VARTANIAN MD, GIRARDEAU JP (1988). Virulence factors and markers in Escherichia coli from calves with bacteremia. Am J Vet Res, 49: 1657-1660.
38. PiR M, HASDEMİR F, GÜLER E ( 1983). İzmir bölgesinde klinik ve subklinik mastiti slere neden olan aerobik mikroorganizmaların İzolasyon, idenritikasyon ve antibiyotiklere karşı duyarlılıklarının saptanması üzerine çalışmalar. Pendik Vet Mikrobiol Enst Dcrg, 15: 37-47.
39. POH P ( 1993). Les souches pathogenes d 'Escherichia coli, histoire et classification. Ann. Med Vet, 137: 325-333.
40. SANCHEZ-CARLO V, McDONALD JS, PACKER RA (1984a). Virulence factors of Esclı erichia coli isolated from cows with acute mastitis. Am J Vet Res, 45: 1775-1777.
41. SANCHEZ-CARLO V, WILSON RA, McDONALD JS, PACKER RA (1984b). Biochemical and seralogic properties of Eschıerichia coli isolated from cows with acute mastitis. Am J Vet Res, 45: 1771-1774.
42. SESLi OT (1985). Sığırlardan izole edilen Esc!ıerichia coli suşlarının hemaglutinasyon yeteneklerinin incelenmesi üzerinde çalışmalar. Etlik Vet Mikrob Derg, 5 : 84-102.
43. WRAY C, CALLOW RJ, SOJKA WJ ( 1983). An examination of Escherichia co/i strains isolated from cases of bovine mastitis for possible virulence determinants. Ver Microbiol. 8: 141-1 45.