Tavuk Kökenli Enterococcus faecium ve Lactobacillus Türlerinin Probiyotik Özelliklerinin Araştırılması
Öz
Bu çalışmada potansiyel probiyotik bakterilerden olan Lactobacillus spp. ve Enterococcus faecium’un sağlıklı tavuklardan izolasyonu ve izole edilen bakterilerin probiyotik olarak kullanılma potansiyellerinin araştırılması amaçlandı. Çalışmada Samsun’da bulunan ticari bir kanatlı hayvan mezbahasında kesim aşamasında olan 50 adet tavuğa ait bağırsak incelendi. Bağırsak mukozalarından alınan örneklerden Lactobacillus spp. ve E. faecium bakterilerinin izolasyonu amacıyla selektif besi yerlerine ekim yapıldı. Şüpheli kolonilerin identifikasyonu PCR ile yapıldı. İzole edilen bakterilerin % 0,5-1,0 safra konsantrasyonlarına direnci için Safra Tolerans Testi gerçekleştirildi. İzolatların pH 3 ve pH 5’e direnç durumları pH Tolerans Testi ile belirlendi. İzolatların hidrofobisiteleri %0,03 Kongo Kırmızılı agar kullanılarak incelendi. İzolatların antibiyotik dirençlilikleri dokuz farklı antibiyotik diski kullanılarak Kirby Bauer Disk Difüzyon Testi ile belirlendi. İzolatların patojen Escherichia coli izolatına karşı antagonistik etkilerinin araştırılmasında Radyal Difüzyon yöntemi kullanıldı. Örneklerden 20 adet E. faecium ve 9’u L. acidophilus olmak üzere 21 adet Lactobacillus spp. izole edildi. İzolatların tümünün % 0,5-1,0 safra konsantrasyonlarına, pH 3-5’e dirençli oldukları saptandı. İzolatların tümünün hidrofobik karakterde olduğu, ancak hiçbirisinin E.coli’ye karşı antagonistik etki göstermediği belirlendi. E.faecium izolatlarının 8 tanesi 8 antibiyotiğe karşı dirençli olarak değerlendirildi. Lactobacillus spp. izolatlarının 1 tanesinin 5 antibiyotiğe ve L. acidophilus izolatlarından da 1 tanesinin 7 antibiyotiğe dirençli olduğu belirlendi ve çoklu dirence sahip suşlar olarak değerlendirildi. Çalışma sonucunda tüm izolatların hidrofobik özellikte olduğu, safra ve düşük pH’ya dirençli olduğu fakat hiçbirisinin E.coli’ye karşı test edilen koşullarda etkili olmadığı belirlendi. Elde edilen sonuçlar, E. faecium, L. acidophilus ve Lactobacillus spp. izolatlarından çoklu antibiyotik direnci gösterenlerin probiyotik olarak kullanılabilir özellikte olduğunu ve in vivo koşullarda etkinlik denemeleri yapılması gerekliliğini göstermektedir.
Anahtar Kelimeler
Kaynakça
- Aarestrup, F.M., Agerso, Y., Gerner-Smidt, P., Madsen, M. & Jensen, L.B. (2000). Comparison of antimicrobial resistance phenotypes and resistance genes in Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium from humans in the community, broilers, and pigs in Denmark. Diagnostic Microbiology and Infectious Diseases, 37(2), 127–137.
- Abdel-Daim, A., Hassouna, N., Hafez, M., Ashor, M.S. & Aboulwafa, M.M. (2013). Antagonistic activity of Lactobacillus isolates against Salmonella typhi in vitro. Biomedical Research International, 15, 680605–680617.
- Balcazar, J.L., Vendrell, D., De Blas, I., Ruiz-Zarzuela, I., Mu´zquiz, J.L. & Girone´s, O. (2008). Characterization of probiotic properties of lactic acid bacteria isolated from intestinal microbiota of fish. Aquaculture, 278, 188–191.
- CLSI. (2013). M02-A11 and M100-S23 Package - Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests; Approved Standard-Eleventh Edition&Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-Third Informational Supplement.
- Dicks, L.M.T. (1993). Lactic acide bacteria: Understanding the microorganism. The keys to successfull use in maximising anti-coliform and anti-Salmonella activity. In: Biotechnology in the Feed Industy. Proceeding of Alltech’s Ninth Annual Sympossium, 151–168.
- Di̇li̇k, Z. & İstanbulluoğlu, E. (2010). Studies on phenotyping and genotyping characterization of Enterococcus spp. isolated from entansive broiler farms and rural poultry establishments. Bornova Veteriner Kontrol ve Araştırma Enstitüsü Dergisi, 32(46), 37–46.
- Fuller, R. (1989). A review. Probiotics in man and animals. Journal of Applied Bacteriology, 66, 365–378.
- Fuller, R. (2004). Reasons for the apparent variation in the probiotic response. Biologist, 51(4), 232.
- Garriga, M., Pascual, M., Monfort, J.M. & Hugas, M. (1998). Selection of lactobacilli for chicken probiotic adjuncts. Journal of Applied Microbiology, 84(1), 125–132.
- Grene, J.D. & Klaenhammer, T.R. (1994). Factors involved in adherence of lactobacilli to human Caco-2 cells. Applied and Environmental Microbiology, 60, 4487–4494.